疫苗研发——病毒颗粒数检测(qPCR)自动化体系构建方案



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随着基因工程技术的发展,病毒载体在目的基因的导入和表达中得到了广泛应用。由于其效率高、适用细胞种类多、瞬时表达等特点,已经广泛应用于疫苗研发领域,对病毒颗粒数进行实时的检测是工艺中的关键环节,病毒的定量检测对于疫苗的指导研发和质量控制具有重要意义。

目前进行病毒定量的方法主要是实时荧光定量PCR方法(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction , RT-qPCR),通过荧光定量的方法对模版拷贝数进行定量, 每个模板的Ct值与该模板起始拷贝数的对数存在线性关系,利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析,从而反映完整病毒颗粒数。

实时荧光定量PCR法目前已经发展成为病毒定量检测使用最广泛的技术之一,具有特异性好、灵敏度高、污染小等优势。但实时荧光定量PCR法前期体系构建样品制备繁琐且不稳定,极占实验员时间和精力的同时也影响定量结果。

welcome欧洲杯Vitae 100 全自动化PCR体系构建系统能够实现体系构建流程自动化,移液准确且稳定,实验结果满足需求,解放双手的同时保证了样品检测结果的可靠性。



整体实验流程

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病毒颗粒数检测(qPCR)整体实验流程




应用场景



welcome欧洲杯生化为某疫苗公司腺病毒颗粒数检测提供自动化体系构建方案,具体方案如下:







实验流程




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疫苗公司腺病毒颗粒数检测自动化体系构建流程



实验结果



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标准曲线图



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样品扩增图

标准曲线图,根据主要Slope数值判断曲线的点稀释是否准确,结果显示,与客户手动操作的slope值(Slope=-3.376)一致,R²=0.999代表曲线偏离,标准曲线配置符合要求。


样品扩增图,底部ROX所在区域越集中,即体系分装越准确。结果显示,体系构建分装准确,符合要求。




产品优势




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Vitae 100全自动PCR体系构建系统


1、机械臂定位准确到0.05mm,移液精确度CV≤2%,数据稳定可靠;

2、仪器能有效解决疫苗研发过程中,样品检测和产品放行人工操作不稳定的困境;

3、加样过程自动化,体系构建全程用时25min,节省时间和人力;

4、配备紫外消毒灯和HEPA过滤装置,保证操作安全性。 



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